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测定电导率

霍格兰溶液每1L水中加0.63g 配10L加6.3g。

钙盐每1L水中加0.48g 配10L加4.8g。

浸出液电导率（最终）=浸出液电导率（测得值）-超纯水电导率

100ml超纯水中

电极入超纯水中滤纸吸干水分

相对电导率（%）=(浸泡液电导率R1-空白电导率)/(煮沸液电导率R2-空白电导率) *100

105℃ 两小时杀青再烘干 1*2h

稀释公式

样品稀释公式

加水量=(稀释前浓度*稀释前体积)/稀释后体积-稀释前体积

eg. 加水量=1500 ng/μl*20μl/150μl-20μl=182μl

酶切连接法构建载体

连接

2μl 116酶(该酶全名称 2 X CE mix Vazyme 100μl；lot：7E701D3 -30–15℃（C116-01-AA）)

2μl 酶切后的空载质粒

1μl PCR胶回收产物(基因片段)

50℃ 5min

单酶切体系（快切）

1μl 单酶切白盖的Q.SmaI

5μl 10 * Q 快速酶的Buffer

1μg 空载质粒(加入量（μl）= 1000ng/质粒浓度)

补水至50μl

单酶切 37℃ 1h

单酶切体系（慢切）

1μl 单酶切 SmaI

2μl 10 * T Buffer

2μl 0.1 BSA%

1μg 空载质粒(加入量（μl）= 1000ng/质粒浓度)

补水至20μl

双酶切选用 Sac I BamH I 各 2.5μl 37℃ 过夜

DNA<=2.5μg

0.5 * K 2.5μl

10*Buffer 5μl

add H2O to 50μl

根毛转化水培苗栽培

ddH2O 3遍

75%酒精 3min30s

上下震荡/摇床

5% NaClO 5-10min

ddH2O 5遍

1/2 ms

4℃ 3天 +25℃ 4 天

切根

水培

阳性检测预混液

阳性检测预混液（μl）

sanTaq H2O 引物1 引物2

X12份 60 36 12 12

X24份 120 72 24 24

EHA105

GV3101

环比线状跑得快

农杆菌

K599 （PCAMBIA2301）kan

-80℃ 常温溶解为半液体

加入1-5μl质粒，轻弹混匀，冰浴15min

液氮5min，37℃ 5min，冰上 2 min

加800μl低盐LB，28℃摇3-4h

6000rpm离心1min，仅留100μl，轻轻吹打（留取100μl的上清，涂板）

GV3101基本同上，但是需要在冰盒内溶解为半液体，放液氮前需要冰上放置5min，28℃仅仅摇2-3h（加900μlLB，且不需要低盐）